上海市多重PCR高通量测序测序

为什么要用单细胞测序技术？细胞是生物体结构和功能的基本单位，在生物体生长发育的过程中，因细胞类型、外界环境以及内部调节因素的不同，其转录组信息也不尽相同。由于基因组和表观遗传的重编程，以及在细胞分裂和分化过程中出现的误差造成来自同一细胞系或个体的细胞呈现出不同的基因组、转录组和表观基因组[4]。这就是我们上面提到的细胞异质性。细胞异质性是生物组织和生物系统的普遍特征[5]。但是我们常规的二代测序检测的是一个细胞群体的基因组、转录组的信息，如培养的大量细胞、动植物组织甚至是整个生物体。在过去的20多年中，人们对转录组的人数仍然局限在群体水平[6]。这种方法可以为我们提供大量的基因组或转录组数据，却无法揭示细胞的异质性。传统方法得到的是细胞群的平均基因组，而单细胞测序测量的是细胞群中单个细胞的基因组[7]。现在也有学者为了区分传统测序和单细胞测序的区别，将传统方法称为批量测序。KBSeq全质粒测序对于样本的量，要求的也比较少。上海市多重PCR高通量测序测序

细胞质检时染料染色的原理：台盼蓝染色原理：台盼蓝不能透过活细胞正常完整的细胞膜，故活细胞不被染色。而死细胞的细胞膜透性增高，可使染料进入细胞内而使死细胞染成淡蓝色。AO/PI染色原理：吖啶橙（AO）是一种小分子染料，可以通过完整的细胞膜，嵌入所有细胞（活细胞和死细胞）的细胞核，呈现绿色荧光；碘化丙啶（PI）只能通过不完整的细胞膜，即死细胞的细胞膜，嵌入所有死细胞的细胞核，呈现红色荧光，通过标记出的绿色荧光和红色荧光就可以辨别出活细胞和死细胞，这种特异性染色的方法也可以排除无核细胞、杂质、碎片等的干扰。上海18s高通量测序测序一台10xGenomics Chromium X仪器能够在单次运行中分析数百至数十万个细胞，让百万级的细胞研究变得常规。

2021年11月1日，在这个平凡而又特殊的日子里，生工生物高通量测序部迎来了一位新成员——10xGenomics Chromium X！不要看我们个头小，我们可是百万级单细胞捕获神器吆。X是如何实现单次运行有这么高的吞吐量呢？多通道+高捕获+10x的CellPlex多样本混样技术。X仪器本身有16个通道（Controller为8通道），每个通道比较多捕获20000个细胞（Controller为10000个细胞）。再结合10x的CellPlex多样本混样技术，每个通道比较多可捕获60,000个细胞，去除双细胞率后，每张芯片比较多可捕获750,000个单细胞。

IlluminaHiSeq2500/4000可以运行PE150/PE250模式，可以承担转录组测序、人基因组重测序、外显子捕获测序、宏基因组测序、微生物分类测序等服务；IlluminaMiSeq运行PE300模式，可以承担细菌基因组重测序/Denovo测序、微生物分类测序、扩增子测序、核酸适配体测序等服务；LifeIontorrentPGM运行314、316、318芯片，可以承接扩增子测序、靶区域测序、基因组重测序服务；PacBioSequel/RSII该测序平台读长超长，平均可达10kb以上，主要承接细菌基因组完成图测序、***基因组精细图测序、全长转录本测序等服务；为什么要用单细胞测序技术？

单细胞测序是什么？单细胞测序是基于高通量测序（Next-generationsequencingtechnology，NGS）方法，检测群体中单细胞基因组、单细胞转录组、单细胞表观基因组及单细胞蛋白组，提供细胞间差异的高分辨率视图，从分子水平揭示细胞奥秘。单细胞转录组测序（Single-cellRNA-Sequencing，ScRNA-Seq）指在单细胞水平上对mRNA进行高通量测序和分析的技术。单细胞转录组测序能获得单个细胞内近万个基因的表达信息，为辨别生物组织中各种细胞类型的转录组特征和全方面揭示细胞之间基因表达的异质性提供了有力的工具[3]。说到细胞异质性（Cellheterogeneity)，就要说到我们为什么要用单细胞测序技术了。关键是KBSeq还可以省钱。上海市small RNA高通量测序原理

在运输前将所有样品管集中放于大包装中。上海市多重PCR高通量测序测序

生工人线粒体基因组测序（多重扩增法），项目介绍：生工生物高通量测序部采用多重扩增技术，对人线粒体基因组进行扩增捕获，并进一步采用Illumina测序平台进行高通量测序。该技术方案可以快速扩增到几乎线粒体全长，并进行高深度测序，下游提供常规比对筛查突变等生物信息分析。客户提供样品类型：1.人来源DNA，浓度大于1ng/ul，总量大于20ng，以Qubit检测结果为准2.运输条件：冰袋运输。交付信息：1.测序原始数据交付实验报告2.测序原始数据3.突变分析结果。上海市多重PCR高通量测序测序

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